時間:2023-12-21 10:28:18
序論:好文章的創(chuàng)作是一個不斷探索和完善的過程,我們?yōu)槟扑]十篇動物醫(yī)學(xué)免疫學(xué)范例,希望它們能助您一臂之力,提升您的閱讀品質(zhì),帶來更深刻的閱讀感受。
[中圖分類號]R392.7
[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]B
[文章編號]1674-4721(2009)12(b)-139-02
動物免疫血清的制備是一項常用的免疫學(xué)實驗技術(shù),廣泛用于臨床診斷、治療和預(yù)防中,為教學(xué)、科研、檢驗之常用。在醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)中,形象、直觀、簡易的直接凝集反應(yīng)有助于學(xué)生了解抗原、抗體及抗原抗體間的免疫反應(yīng)等抽象的概念,免疫血清的質(zhì)量直接影響實驗的特異性和敏感性。因此,制備高質(zhì)量的免疫血清是建立高水平檢測方法的前提條件。但免疫血清的制備較復(fù)雜,且需學(xué)生動手操作,用量較大,為達(dá)到這一目的,除了具備理想的免疫原外,還需要選擇適宜的動物和設(shè)計有效可行的免疫程序或方案。通過多年的工作實踐,筆者制備了高效價、高特異性、高親和性的動物免疫血清,既經(jīng)濟(jì)又方便,供教學(xué)、科研所用,提高了實驗的開出率。
1 方法與結(jié)果
1.1 動物的選擇及飼養(yǎng)
制備抗血清的動物主要是哺乳類和禽類。羊、馬、豚鼠、兔都是常用的動物,在實驗中,選擇動物時應(yīng)考慮抗原與動物的種屬關(guān)系、抗原性質(zhì)與動物種類、免疫血清的需要量、要求以及動物個體等因素。因不同動物對同一抗原的敏感性不同,免疫時至少取用2只以上動物。選擇制備免疫血清的動物必須是適齡、健壯、無感染的正常動物,體重最好在2~3 kg,年齡6個月以上,因雌性動物在性周期的不同階段和懷孕、授乳時機(jī)體對抗原的敏感性有較大改變,所以一般挑取雄性動物。動物免疫后要認(rèn)真做好動物的編號、標(biāo)記、管理和記錄,本實驗用的動物是健康家兔。
1.2 抗原的制備
1.2.1 抗原稀釋
用滅菌生理鹽水將抗原稀釋為2mg/ml,放置4℃過夜,次日取出,與佐劑混合制成乳劑后用于動物免疫。免疫原的注射劑量隨抗原的性質(zhì)有較大差異。一般考慮抗原的免疫原性的強(qiáng)弱、分子量大小、抗原的純度、有無毒性及動物個體狀態(tài)、免疫途徑和時間、佐劑的使用與否等。對于純的可溶性抗原,免疫時需與等量的弗氏完全佐劑混合,其免疫劑量以動物體重計算,一次注入的總劑量以0.5 mg/kg為宜。通常免為100~1000μg/次。另外免疫周期長者可少量多次注射,免疫周期短者可大量少次注射制備高度特異性的抗血清,選用低劑量抗原短程免疫法。
免疫周期隨抗原和免疫方法的不同以及是否使用佐劑而變化。單次注射抗體產(chǎn)生緩慢,效價低,維持時間短,但抗體特異性高;多次注射無以上缺點,但抗體特異性有所降低,一般以3~4次較合適。注射間隔時間一般以1~2周為宜。間隔時間短,起不到再次免疫的作用;太長,則免疫過程延長,從而影響血清的特異性,如無佐劑時間隔2~4d,加用佐劑時可間隔10~30d。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2~4周,此后,每次加強(qiáng)免疫的間隔時間為2~3周。
1.2.2 佐劑和抗原乳劑的配制
1.2.2.1 佐劑的配制。弗氏完全佐劑,各實驗室的配方不盡相同,我室采用的配方如下:醫(yī)用液體石臘20 ml與羊毛脂12g混勻加熱溶化,分裝于青霉素小瓶,用紗布、線繩扎緊瓶塞。高壓滅菌,4℃保存?zhèn)溆谩S诿庖咔皽?zhǔn)備抗原乳劑制備時,以活卡介苗代替死結(jié)核菌,每毫升試劑中加入10mg活卡介苗,即為弗氏完全佐劑。
1.2.2.2 抗原乳劑的制備。本實驗選用注射器推注法:將抗原溶液和等量的完全佐劑(注意佐劑必須先加熱融化。不超過50℃)分別吸入兩個5 ml注射器內(nèi),在兩個注射器的12號針頭間用一根長約8-12 cm的醫(yī)用無毒塑料管。將兩個注射器連接在一起(塑料管必須浸泡消毒與注射器針頭相連接)。針頭塑料管1~2 cm然后兩人相對而坐。緩緩?fù)苿俞標(biāo)ǎ构軆?nèi)溶液進(jìn)入塑料管道至對側(cè)注射器內(nèi),每次必須把管內(nèi)容物全部推出,另一側(cè)同樣操作,使管內(nèi)液體往返混合直至形成油包水乳劑為止。
制成的乳劑是否形成油包水乳劑直接影響免疫效果,因此,必須進(jìn)行質(zhì)量檢查。檢查的方法:將制成的乳劑滴在涼的自來水表面,質(zhì)量合格的乳劑滴入水面保持乳滴珠完整而不分散;如進(jìn)入水面后立即擴(kuò)散,水面油花逐漸擴(kuò)大即不合格,應(yīng)繼續(xù)乳化至合格為止。
1.3 免疫途徑、注射時間、部位及劑量
不同的免疫途徑,抗原在體內(nèi)的的代謝速度不同,對免疫系統(tǒng)的刺激強(qiáng)弱也就不同,因而產(chǎn)生抗體的水平也就不同。抗原的注射途徑可根據(jù)免疫動物個體的大小、抗原及抗體制備目的或要求不同,選用皮內(nèi)、皮下、肌肉、靜脈或腹腔等不同途徑免疫。本實驗對家兔使用皮內(nèi)和皮下多點注射。第1周在足、掌皮內(nèi)注射含佐劑抗原0.1ml,第2周在腹部皮下注射含佐劑抗原0.5 ml,第3周在腹部皮下注射不含佐劑抗原0.5 ml,第4周在腹部皮下注射不含佐劑抗原0.5 ml。
1.4 試血及測定抗體效價
末次注射10 d后于耳靜脈采血2 ml,分離血清進(jìn)行試血。筆者選用免疫雙擴(kuò)散法在56℃條件下加熱30 min滅活補(bǔ)體。在瓊脂板中間孔加稀釋的抗原10μl( mg/ml),周圍孔依順時針方向,分別加入用生理鹽水或PBS按1:2,1:4,1:8,1:16,1:32和1:64的比例稀釋的動物免疫血清。經(jīng)37℃保溫24 h后觀察結(jié)果,效價在1:16以上即可決定采血。選用環(huán)狀沉淀試驗將一定濃度的抗原200μl加入到環(huán)狀沉淀管中,然后在抗原液面上加入稀釋的免疫血清,如在20 min內(nèi),抗原與血清的交界面能出現(xiàn)“++”的沉淀環(huán),以沉淀環(huán)的直徑、大小來判斷效價的高低。一般效價高達(dá)1:2040以上才可放血。
1.5 取血、分離、分裝及保存
免疫動物經(jīng)效價檢測合格后即可考慮取血。為減少血清中的脂肪含量,放血前可考慮停食12 h。本實驗采用心臟穿刺取血,無菌技術(shù)進(jìn)行操作,動物于仰臥位固定,用食指探明心臟博動量高部位,剪去少許毛。用2.5%碘酒和75%酒精消毒后,以9號針頭在預(yù)定位置與胸部呈45。角刺入心臟,微微上下移動針頭,待血液進(jìn)入針筒后,即將注射器位置固定取血。2.5kg體重的家兔一次可取血20~30ml。取血后由靜脈緩緩注入等量5%葡萄糖液以補(bǔ)足失血量。取血的兔子經(jīng)2~3個月休息。可再次加強(qiáng)免疫后取血。
1.6 分離血清及免疫血清的保存
中圖分類號:G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1674-9324(2016)42-0114-02
引言:
《動物免疫學(xué)》、《獸醫(yī)免疫學(xué)》是高等院校動物醫(yī)學(xué)專業(yè)極為重要的一門專業(yè)基礎(chǔ)課。免疫學(xué)已滲透到生命科學(xué)的所有學(xué)科,而動物免疫學(xué)作為免疫學(xué)的一個分支,也已滲透到獸醫(yī)學(xué)及生物科學(xué)的各個領(lǐng)域。在獸醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用主要包含:
1.免疫診斷。例如,基于抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)的血清學(xué)檢測技術(shù),目前已廣泛應(yīng)用于各種動物疫病的診斷。
2.免疫預(yù)防。疫苗免疫已經(jīng)成為防控我國動物傳染病的重要手段。目前,我國對豬瘟、口蹄疫、高致病性禽流感以及高致病性豬繁殖與呼吸綜合癥等四種重大動物疫病實行強(qiáng)制免疫。
3.免疫治療。例如,對發(fā)病個體進(jìn)行抗血清被動免疫的緊急預(yù)防治療。然而,由于《動物免疫學(xué)》具有理論抽象難懂、知識點分散繁多等課程特點,加之與《獸醫(yī)傳染病學(xué)》、《動物生物化學(xué)》等課程的滲透交叉,是動物醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)生普遍認(rèn)為較為難學(xué)的一門課程。
自主學(xué)習(xí)教學(xué)法基于美國心理學(xué)家Carl R. Rogers非指導(dǎo)性教學(xué)理論,是一種以學(xué)習(xí)者為中心,以人為本,引導(dǎo)學(xué)習(xí)者獨立、主動學(xué)習(xí)的教學(xué)方法。在免疫學(xué)的理論與實驗教學(xué)過程中,我們嘗試通過引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí),激發(fā)對免疫學(xué)的興趣,提高學(xué)習(xí)積極性,從而改善教學(xué)效果。本文作者主要根據(jù)切身經(jīng)歷的中美高校獸醫(yī)學(xué)院《動物免疫學(xué)》課程教學(xué),通過比較探討,總結(jié)出以下幾點建議,為我們《動物免疫學(xué)》教學(xué)改革提供參考。
一、通過采用問答教學(xué)方式鼓勵學(xué)生做好課前預(yù)習(xí)
筆者在美國堪薩斯州立大學(xué)(KSU)學(xué)習(xí)工作期間,選修過獸醫(yī)學(xué)院的《獸醫(yī)免疫學(xué)》與生物學(xué)院的《免疫學(xué)》兩門課程。與國內(nèi)的《動物免疫學(xué)》課程相比,美國《獸醫(yī)免疫學(xué)》課程,明顯更加強(qiáng)調(diào)互動教學(xué)。最簡單的一點,國內(nèi)上《動物免疫學(xué)》時,雖然老師也會提醒學(xué)生提前預(yù)習(xí)課程內(nèi)容,但是由于傳統(tǒng)教學(xué)方法通常是按教材滿堂灌,學(xué)生預(yù)習(xí)與否對上課影響不大,因此,造成大多數(shù)學(xué)生都沒有養(yǎng)成認(rèn)真預(yù)習(xí)的習(xí)慣。然而,在美國《獸醫(yī)免疫學(xué)》或者《免疫學(xué)》課堂上,主要是進(jìn)行免疫學(xué)相關(guān)問題的探討。老師會通過連續(xù)問問題的方式引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí),而學(xué)生則根據(jù)預(yù)習(xí)所自學(xué)內(nèi)容分析、討論這些問題,這一問答教學(xué)方式使得課前預(yù)習(xí)變得非常重要。如果沒有很好的課前預(yù)習(xí),很難跟上教學(xué)進(jìn)程。因此,課前預(yù)習(xí)已成為美國大學(xué)生最重要的學(xué)習(xí)任務(wù)之一。
二、通過實際案例講解增強(qiáng)對免疫學(xué)理論知識的理解
美國本科生學(xué)習(xí)《獸醫(yī)免疫學(xué)》和《免疫學(xué)》課程時,教師主要是通過實例教學(xué)完成重點免疫學(xué)知識講解。常用的實例來源包括:
1.最新發(fā)表在免疫學(xué)相關(guān)頂級雜志上的研究內(nèi)容。通過最新研究結(jié)果探討,講解課程上要介紹免疫學(xué)知識,以增強(qiáng)學(xué)生對這一知識點的興趣并加深理解。
2.通過給學(xué)生提前發(fā)放將要講解的知識點相關(guān)經(jīng)典文獻(xiàn)或者案例供學(xué)生自學(xué),再在課堂上進(jìn)行特定案例探討。
3.通過介紹由于免疫學(xué)相關(guān)研究而獲得諾貝爾獎的實例介紹免疫學(xué)知識點。具體案例如:(1)在談到先天性免疫缺陷(SCID)時,通過講述氣泡男孩David Vetter因為患有SCID,在與世隔絕的氣泡內(nèi)生活了12年的故事,使大家對SCID留下深刻的印象。(2)在談到疫苗的作用時,通過講述1979年天花消滅以及2012年牛瘟撲滅的例子,說明疫苗免疫在傳染病防控中的重要作用。(3)德國醫(yī)學(xué)家Emil Von Behring因為發(fā)現(xiàn)抗體并建立血清療法而在1901年獲得首屆諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。美國免疫學(xué)家Bruce A. Beutler與法國生物學(xué)家Jules A. Hoffmann由于在天然免疫功能方面的研究,與加拿大免疫學(xué)家Ralph M. Steinman關(guān)于樹突狀細(xì)胞在獲得性免疫功能方面的研究,而共同分享了2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。通過介紹這些偉大的科研成就,提高學(xué)生學(xué)習(xí)免疫學(xué)的興趣并鼓勵學(xué)生積極參與免疫學(xué)相關(guān)的研究工作。
三、通過任務(wù)安排使學(xué)生自主完成部分教學(xué)內(nèi)容
KSU本科生在《獸醫(yī)免疫學(xué)》、《免疫學(xué)》教學(xué)過程中,與國內(nèi)學(xué)生相比,所需自主參與完成的教學(xué)任務(wù)明顯較多。例如,任課教師會選擇部分重要知識點,根據(jù)班級學(xué)生人數(shù),安排3―5名學(xué)生為一小組,完成某一知識點的自主教學(xué)任務(wù),組內(nèi)人員分工完成相關(guān)資料查詢、教學(xué)課件準(zhǔn)備,并以PPT形式向所有學(xué)生口頭匯報。其他學(xué)生可在課堂上提問,由該組學(xué)生解答。任課老師需在他們完成自主教學(xué)過程中,給予引導(dǎo)、幫助,并做相應(yīng)的補(bǔ)充,以獲得較為良好的教學(xué)效果。此外,學(xué)生需要自主選擇一個較為感興趣的免疫學(xué)相關(guān)問題,通過查閱文獻(xiàn)書籍等資料,寫一份關(guān)于該問題或者知識點的綜述報告,老師會根據(jù)綜述報告完成情況,給予點評并打分。自主教學(xué)與綜述報告都是期末最終考核的重要組成部分。
四、通過雙語教學(xué)促進(jìn)獸醫(yī)專業(yè)課程教學(xué)與國際接軌
隨著教育國際化進(jìn)程的日益推進(jìn),獸醫(yī)專業(yè)本科教育需要積極使用英語等外語進(jìn)行專業(yè)課教學(xué)。特別是近幾年許多高校都從海外引進(jìn)了一批高層次人才,在師資力量上,雙語專業(yè)課教學(xué)已經(jīng)完全可能實現(xiàn)。為推進(jìn)我校獸醫(yī)專業(yè)本科生的雙語教學(xué)改革,建議先采用小班試點制,對部分專業(yè)基礎(chǔ)課或?qū)I(yè)課進(jìn)行雙語教學(xué)實踐。雙語專業(yè)課試點班的順利進(jìn)行需滿足如下要求:
1.試點班學(xué)生必須主觀支持對《動物免疫學(xué)》等專業(yè)基礎(chǔ)課進(jìn)行雙語教學(xué)。同時,試點班學(xué)生還應(yīng)該具有較為良好的英語基礎(chǔ)和一定的專業(yè)知識基礎(chǔ)。
2.專業(yè)課教學(xué)必須采用雙語教材,可以選用較為權(quán)威的英文原版教材為主要教材,并輔以現(xiàn)有的中文教材。
3.試點班任課老師必須同時具有較高的專業(yè)教學(xué)水平與外語水平,可以側(cè)重在具有海外留學(xué)工作背景的教師中選擇合適的專業(yè)課老師進(jìn)行試驗性教學(xué)。
4.要求學(xué)生做好課前預(yù)習(xí)和課后復(fù)習(xí),課堂上教師可多采用問答教學(xué)方式,鼓勵學(xué)生主動參與部分教學(xué)工作,調(diào)動學(xué)生自主參與的積極性,鼓勵創(chuàng)造性思考,提高學(xué)習(xí)興趣和教學(xué)質(zhì)量。
五、小結(jié)
有效進(jìn)行問答教學(xué)、實例教學(xué)、自主教學(xué)和雙語教學(xué)等,必將有助于提高《動物免疫學(xué)》的教學(xué)效果,但是這一方法的有效實施要求學(xué)生必須積極配合,也要求學(xué)生具有一定的專業(yè)基礎(chǔ)知識和較強(qiáng)的自學(xué)能力。同時,對任課教師自身的水平也有更高的要求。因此,為切實做好《動物免疫學(xué)》教學(xué)改革工作,需要根據(jù)生源水平、師資力量等實際情況,與中國學(xué)生目前更加適應(yīng)的傳統(tǒng)教學(xué)法等相互結(jié)合,循序漸進(jìn)地改善《動物免疫學(xué)》教學(xué)效果。
參考文獻(xiàn):
[1]楊漢春.動物免疫學(xué)[M].第2版.北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2003:8-9.
[2]朱建中.醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)過程中科研意識的引導(dǎo)[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育,2002,4(4):299-299.
[3]雷程紅,余佳琳,姚剛,等.案例教學(xué)在《動物免疫學(xué)》教學(xué)中的運用和思考[J].畜牧與飼料科學(xué),2013,34(11):66-68.
[4]余祖華,丁軻,程相朝,等.任務(wù)教學(xué)法在動物免疫學(xué)課程教學(xué)中的探索與實踐[J].中國免疫學(xué)雜志,2015,31(7):966-968.
[5]李任峰,王三虎,田香勤.動物免疫學(xué)雙語教學(xué)的實踐與效果分析[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2009,11(43):150-153.
Enlightenment From the Teaching-learning Model of Veterinary Immunology in United States
CHEN Nan-hua,ZHU Jian-zhong *
[中圖分類號] R554.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 2095-0616(2013)14-28-03
The intervention of amifostine in idiopathic thrombocytopenic purpura mouse
ZHOU Guojian1 WANG Guiming2 CAI Xiaolian2
1.The Second People's Hospital of Zhuhai,Zhuhai 519020,China;2.Foshan Pudamei Bio-pharmaceutical Technology Company Limited,F(xiàn)oshan 528000,China
[Abstract] Objective To study the effect of amifostine on mice models of idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP). Methods Guinea pig anti mice platelet serum(GP-APS) was diluted with saline(1:4),and intravitreal injected into mice once in 2 days for 10 days.Two dosage of amifostine was intravitreal injected into mice in 10 days since mice models of ITP were established. Results Amifostine can enhance the amount of platelets,promote the mature of megakaryocyte of mice significantly and improve the histological pathology of spleen. Conclusion Amifostine is an effective and safety medicine in treating ITP, and can be used widely in clinic.
[Key words] Amifostine;Idiopathic thrombocytopenic purpura;Experimental study
免疫性血小板減少性紫癜(immunologic thrombo-cytopenic purpura,ITP)是一種以血液中血小板計數(shù)減少,骨髓中巨核細(xì)胞正常或增多,多部位、多臟器自發(fā)性出血的常見出血性疾病。其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,許多資料顯示[1-2],除體液免疫外,細(xì)胞免疫起重要的作用。目前對ITP的治療主要包括激素沖擊療法、免疫抑制、脾切除、大劑量免疫球蛋白、達(dá)那吟、干擾素及中醫(yī)藥等一些治療措施,這些治療措施均取得不同程度的治療效果,但也存在水鈉潴留、電解質(zhì)紊亂、促進(jìn)胃酸和胃蛋白酶分泌、升高血糖、血壓、血鉀降低、骨質(zhì)疏松、骨壞死等不良反應(yīng)及對造血系統(tǒng)有毒副作用等。氨磷汀最初作為癌癥化療、放療的輔助藥物,可以減少腫瘤化(放)療所致毒、副作用。但在應(yīng)用過程中人們發(fā)現(xiàn),氨磷汀不僅具有抗氧化作用,其對細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞分化和造血均具有調(diào)控作用。在刺激骨髓多系造血、刺激造血干/祖細(xì)胞生長、誘導(dǎo)巨核細(xì)胞分化、抑制骨髓基質(zhì)細(xì)胞向脂肪細(xì)胞分化等方面具有作用[3]。國內(nèi)也有多篇臨床研究文獻(xiàn)報道氨磷汀對血小板減少性紫癜有較為明顯的效果[4-5],但未見其實驗研究報道。我們對氨磷汀治療免疫性血小板減少性紫癜模型小鼠進(jìn)行研究,取得滿意的效果,研究結(jié)果報道如下。
1 材料與方法
1.1 動物與試劑
BALB/C小鼠,體重18~23 g,共72只,雌雄各半,SPF級,許可證號SCXK(粵)2008-002,購自廣東省醫(yī)學(xué)動物實驗中心;豚鼠,雌性,體重350 g,共8只,普通級,評可證號SCXK(粵)2008-002,購自廣東省醫(yī)學(xué)動物實驗中心。弗氏完全佐劑(北京鼎國生物技術(shù)有限公司產(chǎn),DH-1341-1),弗氏不完全佐劑(北京鼎國生物技術(shù)有限公司,DH-1341-1),EDTA-Na2(天津是巴斯夫化工有限公司,分析純),烏來糖(廣東光華科技股份有限公司,分析純),草酸氨(廣東光華科技股份有限公司,分析純),氨磷汀(大連美羅大藥廠,藥用規(guī)格),潑尼松(西北第二合成制藥廠,藥用規(guī)格),瑞士染色試劑(北京博潤萊特科技有限公司,20120806)。
1.2 儀器與設(shè)備
全自動血液分析儀(法國,ABX Pentra 60),電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司,BSA1245),恒溫水浴鍋(常州澳華儀器有限公司,HA-4),離心沉淀機(jī)(上海亞榮生化儀器廠,80-2),電熱恒溫干燥箱(廣州市康恒儀器有限公司,101-0A),顯微鏡(尼康儀器有限公司,nikon eclipse e100)。
1.3 豚鼠抗血小板抗血清的制備
參考文獻(xiàn)的方法[6-7],取健康BALB/C小鼠,摘眼球取血,靜置半個小時,800 rmp/min離心10 min,取上層血清1500 rmp/min離心15 min,取上層血清900 rmp/min離心10 min,取上層血清3000 rmp/min離心10 min,棄去血清,得底部沉淀血小板,加入1%草酸氨1 mL,靜置5 min,3000 rmp/min離心10 min,棄去上層液體,底部血小板用生理鹽水洗滌3次,用生理鹽水稀釋到濃度為1~2×109/L,分別與弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑按1∶1混合成弗氏完全佐劑血小板抗原混合物與不弗氏完全佐劑血小板抗原混合物,備用;取健康豚鼠8只,于第1周注射弗氏完全佐劑血小板抗原混合物于其四肢、腹股溝、背部、皮下,每處注射100μL,于第2、3、4周注射同劑量的不弗氏完全佐劑血小板抗原混合物。第4周末用20%烏拉坦2 mL腹腔注射麻醉豚鼠,心臟取血。1500 rmp/min離心10 min,取上層血清,余下全血繼續(xù)3000 rmp/min離心10 min。合并2次所得血清,得豚鼠抗小鼠血小板血清APS,-20℃保存,備用。自制直徑9 cm瓊脂糖平板,用打孔器打成梅花形孔,中間孔滴加血小板懸液(500×109/L),周圍孔加1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64不同效價的豚鼠抗小鼠血小板血清。37℃溫箱孵育24 h觀察沉淀弧,檢測抗血清效價。
1.4 模型的制備及分組給藥[8-9]
取60只雌雄各半的健康BALB/C小鼠,隨機(jī)分為5組,每組12只,分別為氨磷汀高劑量組、低劑量組、模型組、正常組和陽性對照組。取出-20℃保存APS,于56℃水浴30 min滅活補(bǔ)體,用生理鹽水稀釋到1∶4的效價,小鼠進(jìn)行腹腔注射。于0、2、4、6、8、10 d按照100μg/20 g小鼠腹腔注入稀釋的抗血清,每2天重復(fù)注射1次,以維持血小板的持續(xù)降低。
從第1次注射APS后,以120 mg/kg劑量腹腔注射作為高劑量組,以60 mg/kg劑量腹腔注射作為低劑量組,每日1次,連續(xù)給藥10 d,強(qiáng)的松龍組,以2.25 mg/kg劑量腹腔注射作為陽性對照組劑量組,模型組及空白對照組給予生理鹽水。
第10天給藥后2 h,摘眼球取血,檢測血小板計數(shù);解剖取出脾臟,稱重,計算脾臟系數(shù);剝離股骨,取出骨髓涂片,瑞士染色法,染色,計算巨核細(xì)胞的分類數(shù)。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理
應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析,計量資料用()的形式表示,采用t檢驗,P
2 結(jié)果
從表1可看出,模型組血小板計數(shù)明顯降低,脾臟系數(shù)明顯升高,成熟巨噬細(xì)胞數(shù)明顯下降,與正常組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
3 討論
紫癜是臨床上常見的出血癥狀之一,是由于患者體內(nèi)存在抗血小板抗體。目前國內(nèi)外對于紫癜的治療主要一線藥物是激素類藥物如強(qiáng)的松、可的松、潑尼松龍等,或是靜脈注射人免疫球蛋白和脾臟切除等。從藥理學(xué)角度看,使用激素進(jìn)行治療主要通過抑制對血小板的吞噬、抑制血小板抗體的生成[10]。脾臟等免疫器官是產(chǎn)生血小板抗體的主要場所,通過產(chǎn)生血小板抗體破壞吞噬血小板,繼而激發(fā)補(bǔ)體系統(tǒng),經(jīng)過經(jīng)典、非經(jīng)典途徑血管外破壞血小板,導(dǎo)致皮下出血現(xiàn)象。但據(jù)臨床統(tǒng)計,使用激素類藥物進(jìn)行治療有復(fù)發(fā)率高,副作用多,療程長等缺點,患者需長期服藥治療。據(jù)統(tǒng)計只有10%~20%患者停藥后沒有復(fù)發(fā)現(xiàn)象。使用脾臟切除治療,對于難治性紫癜20%~30%是沒有效果的[11]。對于體質(zhì)弱的患者,特別是高齡患者[12]。難以長期大劑量接受激素類藥物的沖擊治療。
近年來ITP發(fā)病呈上升趨勢,因此有必要尋找高效低毒的治療藥物進(jìn)行治療。氨磷汀AMF是廣譜細(xì)胞保護(hù)劑,為半胱氨酸衍生物硫磷酸鹽[13],依賴于正常組織中的高濃度以清除自由基,它選擇性地保護(hù)正常組織,其對ITP的治療機(jī)理與激素類藥物、脾臟切除不同。氨磷汀體外對造血祖細(xì)胞生長的刺激作用已獲得肯定,國際上較為多見是將其用到MDS治療上,在研究中發(fā)現(xiàn)約30%骨髓增生異常綜合征的無效造血MDS患者治療后血小板水平有一定提高[4,14]。
本實驗結(jié)果也表明,氨磷汀能很好的升高ITP模型小鼠的血小板,并明顯降低ITP模型小鼠脾臟系數(shù),促進(jìn)ITP模型小鼠巨核細(xì)胞成熟,從而可以初步推測,氨磷汀治療免疫性血小板減少性紫癜可能是通過保護(hù)脾臟免疫性器官,減少血小板抗體產(chǎn)生,減少對血小板吞噬;同時因血小板和巨核細(xì)胞有共同抗原,減少血小板抗體產(chǎn)生,減少抑制骨髓巨核細(xì)胞,使其成熟無障礙,從而血小板的生成不受影響,產(chǎn)板巨核細(xì)胞數(shù)量增多,可產(chǎn)生更多的血小板。
氨磷汀治療免疫性血小板減少性紫癜的作用機(jī)制有待我們進(jìn)一步進(jìn)行驗證。
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1.主動的關(guān)鍵是心動
長期被動的學(xué)習(xí),學(xué)生也逐漸習(xí)慣了,教師讓干什么,就干什么,機(jī)械的聽教師的安排,是以往學(xué)生學(xué)習(xí)的現(xiàn)狀,因而,學(xué)生也養(yǎng)成了讓老師將知識掰碎了揉爛了喂給自己的學(xué)習(xí)形式,內(nèi)心也養(yǎng)成了懶惰被動的不良習(xí)慣,要想變被動為主動,首先要讓學(xué)生心動,即讓他們先具備濃厚的學(xué)習(xí)興趣,用豐富多彩的物理知識和現(xiàn)象調(diào)動他們的積極性。
在物理教學(xué)中,教師要利用好課本的資源,抓住機(jī)遇,創(chuàng)新教學(xué)藝術(shù),培養(yǎng)強(qiáng)化學(xué)生對物理的興趣,呼喚學(xué)生的學(xué)習(xí)內(nèi)驅(qū)力。在現(xiàn)實教育中,教師學(xué)生應(yīng)共同探討,教師要不斷地給學(xué)生以思維的空間和動機(jī),處處設(shè)疑、激疑。例如在教學(xué)"探究平面鏡成像的特點"的一節(jié)課中,最初是完全開放,自主探究。即創(chuàng)設(shè)情境后,由學(xué)生觀察、討論、猜想平面鏡的成像特點,然后自行設(shè)計方案、小組實驗,檢驗自己的猜想是否成立,最終得出成像特點。引導(dǎo)學(xué)生的好奇與思考,激發(fā)他們的思索動機(jī)。
2.讓創(chuàng)新帶動主動性
初中生有強(qiáng)烈的好奇心,這是一份寶貴的財富,利用這份好奇心,教師在初中物理教學(xué)中要著重培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維。具備了這種思維,學(xué)生才能改變以往的被動學(xué)習(xí)的現(xiàn)狀,不再滿足于教師所安排的任務(wù),而是自己有主動發(fā)現(xiàn)問題的動力和源泉。教師也要創(chuàng)設(shè)培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新思維的環(huán)境。首先要科學(xué)設(shè)置問題,以有梯度、思維容量、新奇的問題來帶動學(xué)生的思維,拋磚引玉,促使學(xué)生存疑、質(zhì)疑使學(xué)生對初中物理產(chǎn)生濃厚的學(xué)習(xí)興趣。這樣主動性自然得到了充分的發(fā)揮。例如:講到運動圖像時,曾經(jīng)讓學(xué)生完成這樣一個題目:一人從甲地沿直線勻速出發(fā),到乙地后停下休息,之后又沿原路勻速返回甲地,試畫出該人的s_t時間圖像,在這一問題的解答時,教師不再代替學(xué)生思考,代替學(xué)生畫圖,而是將任務(wù)交給學(xué)生,由學(xué)生自主完成,這樣一來,學(xué)生不在偷懶,也無法偷懶,并且面對這樣形象的問題解答方式,每個同學(xué)都躍躍欲試,積極思考,主動畫圖,主動和其他同學(xué)交流,一時間教師成了輔助,成了配角,學(xué)生了成了主角,他們互相質(zhì)疑,互通有無,有的同學(xué)繪圖思路清晰簡便,便于理解,這從根本上改變了教師一種思維的固有形式,達(dá)到了創(chuàng)新思維共享的可喜局面。
3.在物理知識應(yīng)用中培養(yǎng)學(xué)生的主動性
為了充分運用初中物理知識和在運用中培養(yǎng)學(xué)生積極主動地學(xué)習(xí)習(xí)慣,我結(jié)合生活實際,給學(xué)生創(chuàng)設(shè)情境,以鍛煉他們運用物理課本知識解決生活實際問題的能力。
在我國三國時期, 傳說諸葛亮曾發(fā)明過一種軍事報警信號, 后人稱為孔明燈,它是用很輕的竹皮兒做骨架, 用棉紙糊在外面,只在下面留口,口的下面設(shè)一小架,放一小盤內(nèi)有松香點燃后,燈籠就慢慢的升高,直至升入高空,請問這運用了什么物理原理?
學(xué)生們差不多都放過孔明燈,當(dāng)一聽到這個問題時,都很興奮,便開始積極的思考他的科學(xué)原理,有的同學(xué)說是空氣受熱膨脹,有的說是熱能變成了動能,真是眾說紛紜,眼看同學(xué)們爭執(zhí)不下,我不得不給以提示,即熱氣球的原理,還有就是浮力的知識點等,結(jié)果學(xué)生經(jīng)過獨立思考,終于找到了問題的關(guān)鍵:孔明燈的原理與熱氣球的原理相同,皆是利用熱空氣之浮力使球體升空。然而為何熱空氣會飄浮呢?我們可用阿基米德原理來解釋它:當(dāng)物體與空氣同體積,而重量(密度)比空氣小時就可飛起,此與水之浮力的道理是相同的。將球內(nèi)之空氣加熱,球內(nèi)之一部份空氣會因空氣受熱膨脹而從球體流出,使內(nèi)部空氣密度比外部空氣小,因此充滿熱空氣之球體就會飛起來。通過這樣和生活中學(xué)生感興趣的現(xiàn)象結(jié)合,思考并運用,大大增強(qiáng)了學(xué)生學(xué)習(xí)的主動性,獨立思考的能力也得到了提升,同學(xué)我們學(xué)起物理來更是信心倍增。
2.養(yǎng)勿過偏:綜合調(diào)養(yǎng)要適中。有人把“補(bǔ)”當(dāng)作養(yǎng),于是飲食強(qiáng)調(diào)營養(yǎng),食必進(jìn)補(bǔ);起居強(qiáng)調(diào)安逸,靜養(yǎng)惟一;此外,還以補(bǔ)益藥物為輔助。雖說食補(bǔ)、藥補(bǔ)、靜養(yǎng)都在養(yǎng)生范疇之中,但用之太過反而會影響健康。正如有些人食補(bǔ)太過則會出現(xiàn)營養(yǎng)過剩,過分靜養(yǎng)只逸不勞則會出現(xiàn)動靜失調(diào),若藥補(bǔ)太過則會發(fā)生陰陽的偏盛偏衰,使機(jī)體新陳代謝產(chǎn)生失調(diào)而事與愿違。
所以,在進(jìn)行調(diào)養(yǎng)時應(yīng)采取動靜結(jié)合、勞逸結(jié)合、補(bǔ)瀉結(jié)合、形神共養(yǎng)的方法。
大雪節(jié)氣為大家提供的營養(yǎng)食譜有:
枸杞肉絲
配料: 枸杞20克,瘦豬肉100克,青筍20克,油、鹽、砂糖、味精、紹酒、麻油、干淀粉、醬油適量。
做法:枸杞子洗凈待用。瘦肉、青筍洗凈切絲,拌入少量淀粉。炒鍋燒熱用油滑鍋,再加入適量的油,將肉絲、筍絲同時下鍋翻炒,烹入紹酒,加入砂糖、醬油、食鹽、味精攪勻,放入枸杞子翻炒致熟,淋上麻油即可起鍋。
功效:滋陰補(bǔ)血,滋肝補(bǔ)腎。
這是藥食合用、陰血雙補(bǔ)、明目健身的藥膳方。對于體虛乏力、貧血、神衰、低下、糖尿病患者均有強(qiáng)身益壽之效。
火腿燒海參
配料: 水發(fā)海參200克、火腿50克,素油、黃酒、濕淀粉、白糖、生姜、蔥白、醬油、食鹽各適量。
做法:海參洗凈,切成條塊,放入滾水中略燙后撈出備用。火腿切片備用。炒鍋燒熱放油之后,入蔥姜略炒,再放入海參、火腿翻炒至六、七成熟,倒入黃酒、醬油、白糖、清水,小火煨烤,燒至湯汁濃稠時,濕淀粉勾芡即完成。
功效:補(bǔ)血益精,養(yǎng)血充髓。最適宜精血虧虛,產(chǎn)后虛嬴,陽痿遺精,虛弱勞怯,久病體虛,衰老瘦弱者。
蒜泥茼蒿
配料:大蒜3瓣,茼蒿250克,味精、食鹽、香油適量。
做法:茼蒿洗凈,切一寸長段,大蒜搗爛為泥備用,鍋內(nèi)放入清水煮開,茼蒿下鍋開水焯3分鐘撈出,將蒜泥、味精、食鹽、香油同時放入,攪拌均勻盛盤即可。
功效:開胃健脾,降壓補(bǔ)腦。
[說明]:茼蒿與肉、蛋等葷菜共炒,可提高其所含維生素A的利用率。
大蒜含有一種“配糖體”成分,可預(yù)防動脈硬化,降低血壓,減少血栓形成的幾率。食用大蒜最好生吃,因為大蒜中的有效成分加熱會失去作用。吃蒜后,為消除氣味,可用濃茶漱口或吃幾枚大棗,氣味即可消除。
一般來說,紅色食物都富含天然鐵質(zhì)。并且它們還富含充足的蛋白質(zhì)和優(yōu)質(zhì)維生素、礦物質(zhì)和植物化學(xué)物,具有維護(hù)身體健康、提高身體免疫力、抗氧化、抗微生物的作用,從而能增強(qiáng)人體的抗寒力。因此,冬季常吃紅色食物,不僅有御寒的作用,還能防治感冒。同時,紅色食物在視覺上也能給人刺激,讓人胃口大開,食欲大增。
[中圖分類號]G632.4
[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]B
[文章編號]1006-1959(2009)12-0265-01
根據(jù)目前中專學(xué)生的狀況,要調(diào)動他們的學(xué)習(xí)積極性存在許多困難。首先,現(xiàn)在的中專生是應(yīng)試教育的失敗者,是一些考不上高中的后進(jìn)生或是已脫離學(xué)校教育數(shù)年的社會工作者,他們往往對學(xué)習(xí)缺乏興趣與自信;其二,中專生沒有升學(xué)的壓力,也就缺少了學(xué)習(xí)的動力;其三對基礎(chǔ)課普遍不夠重視,基礎(chǔ)課實驗教學(xué)更是認(rèn)為可有可無。這些現(xiàn)狀在很大程度上與觀念有關(guān),要提高實驗教學(xué)質(zhì)量,轉(zhuǎn)變觀念是關(guān)鍵問題,我在十幾年的病原生物學(xué)與免疫學(xué)基礎(chǔ)實驗教學(xué)(以下簡稱病免學(xué)實驗教學(xué))中總結(jié)出一些方法,與各位同行共勉。
1 良好的師生關(guān)系是促使學(xué)生自覺學(xué)習(xí)的基礎(chǔ)
1.1 建立良好的師生關(guān)系,減輕學(xué)生的壓力,使學(xué)生能在輕松愉快的環(huán)境下學(xué)習(xí),為提高教學(xué)質(zhì)量奠定一個良好的感情基礎(chǔ)。而良好師生關(guān)系的建立離不開教師的“為人師表”,自己要起到表率作用,不僅在學(xué)識上,而且在學(xué)習(xí)、生活的各個方面,做到“學(xué)高為師,身正為范”,使學(xué)生心悅誠服。通過學(xué)識、人格方面吸引學(xué)生,同時要關(guān)心學(xué)生,實驗操作過程中與學(xué)生溝通并及時解決實驗時遇到的困難。只有付出自己的愛心,才能獲得豐厚的回報。
1.2 處于中專階段的學(xué)生,逆反心理較強(qiáng),簡單粗暴的方式不但解決不了問題,而且常常會激化矛盾,使教師與學(xué)生對立起來,既影響師生關(guān)系,更影響教學(xué)效果。應(yīng)常規(guī)管理與學(xué)生養(yǎng)成教育相結(jié)合,對違反實踐操作的行為不只是簡單地批評和教育,而是要求學(xué)生認(rèn)識到錯誤,讓他們意識到問題的所在,培養(yǎng)學(xué)生良好的行為習(xí)慣和責(zé)任心,培養(yǎng)學(xué)生的公德意識,,與素質(zhì)教育接軌。
2 培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣
病原生物學(xué)與免疫學(xué)基礎(chǔ)是一門較抽象的學(xué)科,(下轉(zhuǎn)267頁)
(上接265頁)在許多學(xué)生眼里是屬于枯燥無味并聽不懂的,在學(xué)習(xí)時困難重重,所以,理論課對學(xué)生來說缺乏吸引力,但實驗操作能驗證理論,并通過實踐加深對理論知識的理解,為學(xué)生掌握理論知識起搭橋作用,所以應(yīng)按教學(xué)大綱計劃實驗個數(shù),并積極設(shè)計實驗,在每一次的實驗教學(xué)中盡量給予學(xué)生多動手練習(xí)的機(jī)會,培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。
3 培養(yǎng)學(xué)生端正的學(xué)習(xí)態(tài)度
一些學(xué)生認(rèn)為病免學(xué)基礎(chǔ)實驗只是專業(yè)基礎(chǔ)實驗課,在今后的工作中很少用得到,沒有必要在這上面耗費精力。學(xué)生的偏科思想影響到教學(xué)質(zhì)量提高,因此,端正的學(xué)習(xí)態(tài)度是調(diào)動學(xué)生學(xué)習(xí)積極性的關(guān)鍵。讓學(xué)生明確理論需要實踐來驗證,實踐是理論知識的延伸,隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)教育科學(xué)的不斷發(fā)展,教育的內(nèi)容和手段不斷更新,實踐教學(xué)越來越成為全面實施素質(zhì)教育,培養(yǎng)學(xué)生實踐技能、創(chuàng)新能力、科技素質(zhì)的一個重要部分,是教學(xué)中一項不可缺少的環(huán)節(jié),是任何教學(xué)手段都無法代替的。
4 制訂實驗教學(xué)目標(biāo)
對學(xué)生實驗提出明確、具體的要求和目標(biāo),讓學(xué)生帶著一定的任務(wù)做實驗。有了具體的實驗教學(xué)目標(biāo),學(xué)生實驗時才有矩可循。教學(xué)目標(biāo)制訂應(yīng)以掌握操作的正確方法和要領(lǐng)為起點,在不同階段,提出的目標(biāo)應(yīng)有所不同,循序漸進(jìn)、配合實習(xí)進(jìn)度、由淺入深、由簡到繁穩(wěn)步前進(jìn),不急于求成。例如:實驗原理、目的、步驟、結(jié)果和實驗報告書寫等,逐步示范、分析并直接求教操作過程,養(yǎng)成按一定程序有條不紊地進(jìn)行實驗的習(xí)慣,以后的實驗就不再這樣,而是逐步引導(dǎo)學(xué)生在理解實驗原理和內(nèi)容的基礎(chǔ)上,自己獨立或分小組按教學(xué)要求設(shè)計實驗步驟、操作過程、分析實驗結(jié)果等,從而提高學(xué)生的實驗?zāi)芰退仞B(yǎng)。
5 督促學(xué)生預(yù)習(xí)
預(yù)習(xí)是保證學(xué)生的學(xué)習(xí)成為良性循環(huán)的關(guān)鍵。為了保證授課的效率,應(yīng)督促學(xué)生做好課前預(yù)習(xí)。對于自覺性較差的中專學(xué)生來說,在沒有老師監(jiān)督的情況下,怎樣才能做到呢?我們可以采取上課提問、記平時成績等手段,督促學(xué)生做好預(yù)習(xí)。
6 總結(jié)講評
實驗結(jié)束后,組織學(xué)生對實驗情況進(jìn)行總結(jié)講評,使學(xué)生了解自己在訓(xùn)練中的優(yōu)點和不足之處,學(xué)生發(fā)現(xiàn)不足就可以立即改進(jìn),教師對學(xué)生的成績要及時予以肯定,激發(fā)學(xué)生的上進(jìn)心,教師還應(yīng)注意利用技能評價引導(dǎo)學(xué)生相互比較,增加競爭意識,不斷積累實踐經(jīng)驗。
7 加強(qiáng)課外學(xué)習(xí)環(huán)境的建設(shè),為學(xué)生提供良好的學(xué)習(xí)空間
一、探究式教學(xué)在生物課堂上更有用武之地,并將有損學(xué)生身心的因素減少到最低限度。
二、動、植物活體實驗材料尤其是動物活體走進(jìn)課堂有兩方面的負(fù)面影響。
三、一位中學(xué)生的一份特殊“試驗報告”。
四、負(fù)面影響的危害及應(yīng)對措施的淺見。
中學(xué)生物課是理論與實踐結(jié)合相對緊密的學(xué)科,該學(xué)科突出特點是實踐性很強(qiáng),其中探究性實驗是實踐活動中或曰探究過程中的重要的師生互動中頻繁使用的教學(xué)手段。因為中學(xué)生物學(xué)科中抽象的科學(xué)概念、科學(xué)理論完全能通過實踐活動而達(dá)到輕松地理解和掌握;且動物或植物等實驗材料來源廣泛大多都能就地取材。因此,探究式教學(xué)在生物課堂上更有用武之地,探究式教學(xué)成效顯著是不言而喻的。但是,探究教學(xué)要求每個學(xué)生都積極參與教學(xué)過程,承擔(dān)相應(yīng)的學(xué)習(xí)責(zé)任,因此這種教學(xué)要有效,就必須是一種危險度低的學(xué)習(xí)。學(xué)生既不感到有傷身體,也不感到有失面子,更不能讓學(xué)生因探究感到自卑而變得萎靡不振。這要求教師無論進(jìn)行哪種探究教學(xué),都要考慮到各種探究的可能后果,采取恰當(dāng)措施,把這種有損身心的因素減少到最低限度(《探究教學(xué)的學(xué)習(xí)與輔導(dǎo)》靳玉樂主編P39)。在動、植物活體實驗走進(jìn)課堂之時我們就不能不注意安全問題,就不能不考慮其負(fù)面影響。筆者認(rèn)為,動、植物活體實驗材料尤其是動物活體走進(jìn)課堂至少有兩方面的負(fù)面影響:一是可能對師生的身體造成傷害;一是可能對師生的身心(尤其是對學(xué)生的身心)造成傷害。前者,我們可以采取一定的防護(hù)措施諸如戴口罩、手套,穿防護(hù)衣等就可以避免諸如病毒感染、咬傷、刺傷等對人的侵害,那么對于后者呢?如將一只兔子的腦袋割掉,來探究神經(jīng)如何跳動,這場面對學(xué)生來說是傷害,是學(xué)知識?這有沒有什么措施來防護(hù)呢?這,很顯然就是一個值得探究的安全問題。
我們不妨來看看一位中學(xué)生交上來的一份“試驗報告”:
生死實驗
可是一看到實驗室或者講臺,就想到屠場。一看到生物老師就想起了“劊子手”……
我寧可不學(xué)神經(jīng)知識,也不做“劊子手”。
為學(xué)有關(guān)神經(jīng)知識,我和老師一道,將“善良”的小白兔斬首,來觀察兔子的神經(jīng)如何跳動;有時將“可愛”的青蛙的腦袋釘進(jìn)大頭針,來了解大腦神經(jīng)中樞的作用;偶爾把可惡的老鼠的頸椎折斷,看看它的頸以下的身體有沒有知覺……
原來,神經(jīng)是動物身上的“電路”,動物在“斷電”的情況下,竟如此痛苦,它們都在經(jīng)受折磨之后死去。
按說我應(yīng)該感謝老師能用這么直觀的方式,教給我們一些有關(guān)神經(jīng)知識才是,可是一看到實驗室或者講臺,就情不自禁地想到了屠場,一看到生物老師就身不由己地想起了“劊子手”。一到用動物活體做實驗場面,我仿佛也經(jīng)受了一次生死實驗,似乎看見“康大叔”舉起了砍刀,“夏瑜”的人頭落到地上,他的血被別人當(dāng)成了藥物賣了,去治“華小栓”的“癆病”;似乎看見日本鬼子,手舞東洋戰(zhàn)刀,舉行“”30余萬同胞被剖腹、斷肢、剝皮、砍頭、活埋……生物老師用極其殘忍的手段,直觀地演示一個個屠殺場面,啟發(fā)我聯(lián)想到古今中外的刑場。原來生命這般脆弱!這樣不值錢!
我不知道,我的心靈是否受到了傷害,我只知道,我的心靈在多次撞擊之下而逐漸“斷電”越來越麻木不仁。
有人說“人要有愛心”——是不是胡說?
有人說“動物是人類的朋友”——是不是癡人說夢?
有人說“保護(hù)生態(tài)平衡”——是不是烏托邦設(shè)想?
老師說“神經(jīng)是動物身上的‘電路’”——正確,比喻形象!
神經(jīng)也是人身上的電路,我的心靈不能在生物實驗中“斷電”,我再也不要去做解剖的“幫兇”了!
我寧可不學(xué)有關(guān)神經(jīng)知識,也不做“劊子手”,喚回我的良知,復(fù)位我的人性。
看了這個特殊的“試驗報告”,作為一名生物老師的心是難得平靜的,探究式教學(xué)中的安全問題應(yīng)盡快擺到教學(xué)議事日程上來。中學(xué)生的心理是比較脆弱的,極易受到傷害,即使是一些恐怖、殘忍、不健康等場面或情景,都對學(xué)生的身心造成影響甚至是傷害,這與當(dāng)前實施素質(zhì)教育,“著力培養(yǎng)學(xué)生積極向上的健康心理”的要求相背。生物課的教育同其它學(xué)科的教育一樣,也是對人的教育,教師的熏陶和引導(dǎo)是教育的主導(dǎo)因素,是矛盾的外因,外因能影響內(nèi)因,外因通過內(nèi)因而起作用。因此,注意探究式教學(xué)之中的安全問題應(yīng)從我們教師自身作起,且必須嚴(yán)肅認(rèn)真地對待。轉(zhuǎn)貼于
也許有人問:生物課堂上還要不要去做動物活體實驗?當(dāng)然要做!做實驗由于要求學(xué)生直接參與學(xué)習(xí)過程,有利于形成操作技能,學(xué)生通過做實驗解決問題,所學(xué)到的不僅是問題的答案,他們也學(xué)會觀察、測量、操作和推理,更重要的是學(xué)會獨立學(xué)習(xí)。我們絕不能因其負(fù)面影響而用講實驗去替代做實驗甚至取消實驗。我們不但要重視探究實驗的過程,也要重視結(jié)果,可以“采取恰當(dāng)措施,把這種有損身心的因素減少到最低限度”。諸如將動物活體“斬首”、“截肢”、“剖腹”等殘忍地操作,應(yīng)由現(xiàn)場挪至“幕后”,避開學(xué)生的面,即應(yīng)多多思考:如何明智地選取哪些需要通過探究實驗才能達(dá)到最佳效果的學(xué)習(xí)目標(biāo)以及應(yīng)組織什么性質(zhì)的探究活動的問題,對實驗的整個環(huán)節(jié)作科學(xué)地取舍,舍去那些有害學(xué)生身心的環(huán)節(jié),舍去的環(huán)節(jié)可以用其他教學(xué)策略和手段加以彌補(bǔ)。何況,事實上有許多教學(xué)方法都可以促進(jìn)科學(xué)學(xué)習(xí)目標(biāo)的實現(xiàn),唯“實驗論”是不正確的。再者,由于生物實驗而對學(xué)生造成了傷害完全是教師的“主觀無意”所致,只要我們在探究式教學(xué)的過程中“有意注意”到安全問題,就有條件達(dá)到“把這種有損身心的因素減少到最低限度”的目的。
筆者對探究式教學(xué)中的安全性問題的認(rèn)識還相當(dāng)淺薄,還不能夠提出建設(shè)性的應(yīng)對措施,希望做到“拋磚引玉”。
主要參考書目:
1、靳玉樂主編·探究教學(xué)的學(xué)習(xí)與輔導(dǎo)·中國人事出社,2002.
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(s).2014.01.667文章編號:1004-7484(2014)-01-0553-01
在20世紀(jì)80年代末期我國第一本臨床免疫學(xué)檢驗知識的教科書出版了,經(jīng)過20年時間的發(fā)展及研究人員的不斷更新。免疫學(xué)檢驗已經(jīng)在我國的臨床醫(yī)學(xué)中占據(jù)著非常重要的位置,這一學(xué)科能夠影響醫(yī)學(xué)上的其它學(xué)科,甚至對生命產(chǎn)生影響[1]。隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展,臨床免疫學(xué)檢驗學(xué)科的發(fā)展空間更為廣闊,涉及的內(nèi)容已經(jīng)延伸到分子生物學(xué)、生物學(xué)等各個領(lǐng)域,同時,醫(yī)學(xué)其它學(xué)科應(yīng)用臨床免疫學(xué)的幾率也在逐漸的上升,因此就奠定了臨床免疫學(xué)檢驗學(xué)科在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的位置。
1臨床免疫學(xué)檢驗學(xué)科的發(fā)現(xiàn)及發(fā)展
臨床免疫學(xué)檢驗學(xué)可的建立已經(jīng)超過100年的歷史,其主要在多種細(xì)菌感染實驗中形成,起初一些學(xué)者主要研究傳染病患者及免疫動物,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)兩者的血清中都有特異性質(zhì)的結(jié)合病原體,此外還具有能夠加快這些病原體形成的物質(zhì),有學(xué)者將這些病原體物質(zhì)統(tǒng)一稱為抗體,能夠促進(jìn)抗體形成的物質(zhì)稱為抗原。1900年Landsteiner等發(fā)現(xiàn)人類血型有ABO三個情況,自此臨床免疫學(xué)檢驗學(xué)科中誕生一種新型且重要的檢驗項目——血型鑒定[2]。1897年Kraus證實將細(xì)菌培養(yǎng)物濾液和對應(yīng)的抗血清進(jìn)行混合會產(chǎn)生沉淀情況,1898年Bordet基于補(bǔ)體溶血體系組建補(bǔ)體結(jié)合方案,1906年wassermann等創(chuàng)新使用補(bǔ)體結(jié)合方案來對梅毒患者進(jìn)行診斷。1900-1930年期間,內(nèi)毒素Shwartzman反應(yīng)、血清疾病、過敏反應(yīng)、調(diào)理作用、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、皮膚反應(yīng)、Arthus反應(yīng)等逐漸廣為人知,免疫疫苗走上了迅速發(fā)展的道路,白喉類毒素預(yù)防、卡介苗等陸續(xù)出現(xiàn)。
2臨床免疫學(xué)檢驗技術(shù)的實際應(yīng)用現(xiàn)狀
2.1鑒定血型與檢測腫瘤標(biāo)記物現(xiàn)今在應(yīng)用免疫學(xué)檢驗技術(shù)的基礎(chǔ)上,為劃分白細(xì)胞HLA類型奠定了基礎(chǔ),同時測定多種紅細(xì)胞血型。通過對人促絨毛膜性腺激素、癌抗原125、癌胚抗原、糖鏈抗原19-9、前列腺特異抗原、癌抗原153、糖鏈抗原72-4、甲胎抗原等多種抗原進(jìn)行免疫學(xué)檢測,能夠得到腫瘤患者的相關(guān)數(shù)據(jù)、信息及資料,輔助醫(yī)生做出正確的診斷,提高臨床治療效果,同時預(yù)防腫瘤再次出現(xiàn)[3]。
2.2檢測細(xì)胞免疫功能細(xì)胞免疫功能檢測方法主要依據(jù)生物學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分析,例如淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗、淋巴細(xì)胞毒試驗、花環(huán)形成試驗、溶血空斑試驗等方式來獲取,這樣可以幫助醫(yī)生更全面的掌握免疫情況。
2.3免疫細(xì)胞與血液學(xué)的測定隨著各項技術(shù)的高速發(fā)展,醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)乖懊庖呒?xì)胞表層受體有了更加全面的了解,多種特異性單克隆抗體可運用雜交瘤技術(shù)來獲取,這就為免疫細(xì)胞的測定創(chuàng)造了一定的條件。
2.4檢測藥物臨床上常會運用藥物進(jìn)行治療,一些藥物會導(dǎo)致患者出現(xiàn)不良反應(yīng),因而,對患者體內(nèi)的藥物情況進(jìn)行全面掌握時非常重要的。對患者體內(nèi)藥物進(jìn)行檢測已經(jīng)成為醫(yī)生監(jiān)控患者體內(nèi)藥量的重要方法,這種方法也可以用于檢測患者有無吸食。
2.5檢測鑒別傳染性疾病傳染病是由病原體導(dǎo)致的,可以在人與人之間、人與動物之間以及動物與動物之間傳染。較為常見的有:乙肝、流行性感冒、細(xì)菌性痢疾、結(jié)核病、流腦、急性出血性結(jié)膜炎(紅眼病)等[4]。
2.6檢測蛋白質(zhì)、酶、免疫因子人體中的每個細(xì)胞及重要組成部分均存在蛋白質(zhì),是由20多種氨基酸根據(jù)不同比例組成的,實時的在體內(nèi)進(jìn)行更新和代謝。酶是生物催化劑,免疫因子是免疫球蛋白IgG抗體。這些物質(zhì)在人體內(nèi)非常小的量就可以被檢測到。
3小結(jié)
對臨床免疫學(xué)檢驗學(xué)科的發(fā)展及應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行分析,我們清晰的發(fā)現(xiàn)這一學(xué)科的在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要性。免疫學(xué)檢驗學(xué)科經(jīng)過長時間的發(fā)展,在更廣闊及更深的層次內(nèi),推動了生物高技術(shù)的發(fā)展。可以確定的是,臨床免疫學(xué)檢驗學(xué)科的研究還會為醫(yī)學(xué)提供更多的新型藥物,其在臨床的應(yīng)用和開發(fā)必然會為疾病的治療和預(yù)防提供更加長遠(yuǎn)的影響,而且將會為社會創(chuàng)造更加深遠(yuǎn)的經(jīng)濟(jì)效益。
參考文獻(xiàn)
[1]樊寧,孫福生.免疫學(xué)檢驗方法的進(jìn)展和應(yīng)用[J].醫(yī)學(xué)綜述,2011,23(07):452-453.
中圖分類號:G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號:1674-9324(2014)42-0118-02
教育部衛(wèi)生部關(guān)于實施卓越醫(yī)生教育培養(yǎng)計劃的意見中指出:卓越醫(yī)師計劃的目的是培養(yǎng)適應(yīng)我國醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展的高水平醫(yī)學(xué)人才,提升我國醫(yī)療衛(wèi)生服務(wù)能力、水平和國際競爭力。近年來科學(xué)技術(shù)迅猛發(fā)展,特別是免疫學(xué)已成為一門前沿學(xué)科和邊緣學(xué)科,它的發(fā)展已經(jīng)涉及到生命科學(xué)的各個領(lǐng)域(醫(yī)學(xué)、動物、植物等)。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)是一門重要的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)課,這與其實驗研究密切相關(guān)。因此,實驗教學(xué)是該學(xué)科不可缺少的重要環(huán)節(jié),是理論教學(xué)的補(bǔ)充和擴(kuò)展。通過學(xué)生動手操作、動腦分析得出與理論相符合的實驗結(jié)論,鞏固理論知識,而且可以提高學(xué)生的操作技能和解決問題的能力,樹立科學(xué)的態(tài)度[3]。筆者根據(jù)卓越醫(yī)師培養(yǎng)計劃,在免疫學(xué)實驗教學(xué)中,除加強(qiáng)理論教育外,注重實驗教學(xué),保證教育質(zhì)量,以培養(yǎng)與國際接軌的醫(yī)學(xué)人才。現(xiàn)就對實驗課教學(xué)改革介紹如下:
一、在實驗教學(xué)中,充實實驗教學(xué)內(nèi)容
我們教研室免疫學(xué)實驗教學(xué)的傳統(tǒng)項目是靜脈采血、細(xì)胞抗原片制備、淋巴細(xì)胞分離、血清分離、免疫酶技術(shù)(ELISA檢測乙肝表面抗體)、免疫熒光技術(shù)(B淋巴細(xì)胞熒光標(biāo)記試驗)、ABO血型鑒定。增加了抗原的制備、免疫血清的制備和流式細(xì)胞術(shù)(檢測CD4、CD8)。免疫血清的制備稱為完整綜合實驗,從第一次到第五次實驗都包含有它的內(nèi)容;流式細(xì)胞儀在臨床上應(yīng)用是比較前沿的。這樣使實驗教學(xué)內(nèi)容得到充實和完善。
二、在實驗教學(xué)中,注重技能和興趣的培養(yǎng)
實驗課要求學(xué)生課前預(yù)習(xí),讓他們做到心中有數(shù),操作有條理。開設(shè)的實驗都是學(xué)生自己操作。他們通過雞心臟采血、人靜脈采血、家兔靜脈注射抗原及心臟采血的具體操作,初步掌握了采血的基本要領(lǐng),獲取合格的標(biāo)本(血液、組織),是進(jìn)行免疫學(xué)檢測的基本保證;從第二次實驗到第五次實驗,上課先隨機(jī)分別叫同學(xué)介紹不同實驗的目的、原理、方法及操作步驟,不足之處教師再進(jìn)行補(bǔ)充,然后進(jìn)行示教,并告知實驗的注意事項;在操作過程中要巡回指導(dǎo),以便培養(yǎng)學(xué)生規(guī)范的操作技能;每次實驗要進(jìn)行結(jié)果分析討論,要求撰寫實驗報告。通過以上過程提高了學(xué)生的獨立思考及操作技能,建立了學(xué)生實驗課的興趣,調(diào)動其學(xué)習(xí)積極性,達(dá)到了滿意的教學(xué)效果。
三、在實驗教學(xué)中,加強(qiáng)與臨床的緊密結(jié)合
免疫學(xué)實驗教學(xué)的目標(biāo)是掌握基本的技能和原理.培養(yǎng)學(xué)生的思維能力,并將所學(xué)的免疫學(xué)知識與臨床結(jié)合進(jìn)行分析討論。如做ABO血型鑒定,同時介紹交互配血試驗,有時同型血交互配血也不符合,說明原因,注重講解輸血不符引起Ⅱ型超敏反應(yīng)最終導(dǎo)致溶血反應(yīng),病人輸血時要重點觀察。ELISA檢測乙肝表面抗體我們要介紹乙型肝炎的基本情況,對乙肝五項(HBsAg、HBeAg、抗HBs、抗HBe、抗HBc)化驗結(jié)果進(jìn)行臨床分析,當(dāng)抗HBs陽性時,說明機(jī)體不再會被乙肝病毒感染,當(dāng)五項均為陰性時,最好接種乙肝疫苗,當(dāng)大三陽時必須進(jìn)行治療。B淋巴細(xì)胞熒光標(biāo)記試驗在加熒光抗體37℃孵育1h,向同學(xué)重點介紹三大標(biāo)記技術(shù)(酶標(biāo)記技術(shù)、熒光標(biāo)記技術(shù)、放射免疫技術(shù))與經(jīng)典的凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)都具有敏感性高、特異性強(qiáng)、結(jié)果準(zhǔn)確的特點,但標(biāo)記技術(shù)敏感性極高可精確到pg-ng級水平,而凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)只能精確到mg-ug,敏感性相差106-109倍,正因為標(biāo)記技術(shù)的敏感性極高,在很多的疾病檢測中基本取代了凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)而廣泛用于臨床,特別在一些標(biāo)記物的檢測中,達(dá)到疾病早期診斷的目的。
四、在實驗教學(xué)中,注重醫(yī)學(xué)綜合能力的培養(yǎng)
非卓越醫(yī)師計劃培養(yǎng)開設(shè)的實驗內(nèi)容均為本次完成,除此之外,卓越醫(yī)師計劃培養(yǎng)還增加了免疫血清的制備,把它稱為完整綜合實驗,包含了(抗原制備、免疫程序制訂、動物免疫、免疫血清提取、抗體效價測定)。五次實驗都有免疫血清制備的內(nèi)容:如抗原的制備必須注意無菌觀念的建立并落實在實際操作中;免疫程序的制定要排出具體的時間、免疫的劑量和部位;免疫動物為家兔,每組2只,選擇重量在2Kg以上的健康家兔進(jìn)行免疫,免疫接種后要觀察動物的情況并注意喂養(yǎng);免疫到時間應(yīng)先試血檢測抗體水平,達(dá)到要求進(jìn)行免疫血清提取;抗體效價測定用凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)和溶血反應(yīng)檢測。通過系統(tǒng)實驗既培養(yǎng)了學(xué)生團(tuán)結(jié)協(xié)作和實際操作能力,又提高了分析問題和解決問題的能力,進(jìn)而提高了學(xué)生的綜合素質(zhì)。
五、在實踐教學(xué)中,注重醫(yī)學(xué)生創(chuàng)新思維的培養(yǎng)
隨著免疫學(xué)和免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展,免疫學(xué)檢測已成為生物學(xué)實驗和醫(yī)學(xué)檢驗中的一個重要部分,免疫學(xué)教師必然站在該學(xué)科發(fā)展的前沿,為了幫助學(xué)生了解診斷疾病,研究病因的方法及免疫學(xué)新技術(shù),在卓越醫(yī)師教改班教研室把開展科學(xué)研究的流式細(xì)胞儀用于教學(xué)來檢測同學(xué)自己外周血中的CD4、CD8數(shù)量,充實了實驗內(nèi)容。通過實驗,把教研室取得的科研成果與實驗內(nèi)容相結(jié)合進(jìn)行講解,把教研室在研的國家自然科學(xué)基金、省基金課題的情況向同學(xué)們進(jìn)行介紹,以及教研室宣傳欄懸掛了從1901年以來18幅榮獲醫(yī)學(xué)諾貝爾獎的免疫學(xué)家及他們獲獎的研究內(nèi)容的宣傳介紹,使很多同學(xué)產(chǎn)生了好奇心,對科學(xué)研究產(chǎn)生了較濃厚的興趣,培養(yǎng)了他們的創(chuàng)新思維,從而進(jìn)一步提高了免疫學(xué)實驗教學(xué)效果。
總之,通過在我校卓越醫(yī)師計劃的免疫學(xué)實驗教學(xué)改革的嘗試,使同學(xué)對免疫學(xué)在醫(yī)學(xué)上的重要作用有了深刻的了解,知道了免疫學(xué)在醫(yī)學(xué)上已廣泛用于疾病的預(yù)防、診斷、治療,并對一些疾病的發(fā)病機(jī)制、器官移植等方面的研究均具有較好的發(fā)展前景和現(xiàn)實意義,為培養(yǎng)合格的醫(yī)學(xué)衛(wèi)生人才打下堅實的基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn):
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免疫是人體的一種生理功能,人體依靠這種功能識別“自己”和“非己”成分,從而破壞和排斥進(jìn)入人體的抗原物質(zhì),或人體本身所產(chǎn)生的損傷細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等,以維持人體的健康。每個人的體內(nèi)都有針對腫瘤細(xì)胞的免疫殺傷細(xì)胞,包括NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和細(xì)胞毒T細(xì)胞等。NK細(xì)胞也叫自然殺傷細(xì)胞,在機(jī)體早期殺傷腫瘤細(xì)胞的免疫監(jiān)視過程中具有重要作用,可以非特異性的殺傷腫瘤細(xì)胞,體內(nèi)的許多細(xì)胞因子如IL2、IFNγ等都可以活化NK細(xì)胞,增強(qiáng)NK細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷功能。NK細(xì)胞主要分布在血液中和淋巴組織。巨噬細(xì)胞被IFNγ等細(xì)胞因子活化后,也具有殺傷腫瘤細(xì)胞的功能,巨噬細(xì)胞則廣泛分布于全身各種組織,它可以及時發(fā)現(xiàn)并清除體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞,防止機(jī)體形成腫瘤。抵抗或防止微生物或寄生物的感染或其他所不希望的生物侵入的狀態(tài)。
免疫涉及特異性成分和非特異性成分。非特異性成分不需要事先暴露,可以立刻響應(yīng),可以有效地防止各種病原體的入侵。醫(yī)學(xué)上重要的抗原:①病原微生物及各種生物疫苗:每種病原微生物都是由多種抗原組成的復(fù)合體,都是良好的抗原,能誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答。如細(xì)菌、病毒螺旋體等對人有較強(qiáng)的免疫原性。刺激機(jī)體可產(chǎn)生抗體,臨床上可通過檢測抗體診斷相關(guān)的疾病;亦可將病原微生物制成疫苗,用于預(yù)防疾病。②細(xì)菌外毒素和類毒素,外毒素:是細(xì)菌在生長過程中分泌到菌利外的毒性物質(zhì)。毒性極強(qiáng),對組織細(xì)胞有高度選擇性,引起特殊的臨床表現(xiàn),外毒素為蛋白質(zhì),有很強(qiáng)的免疫原性,能刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。如:破風(fēng)外毒素、白喉外毒素。類毒素:外毒素甲醛處理,失去毒性保留免疫原性,即成類毒素。可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素,用于人工自動免疫,常用的類毒素有白喉類毒素和破風(fēng)外毒素。③動物免疫血清,用微生物或其代謝產(chǎn)物對動物進(jìn)行人工自動免疫后,收獲含有相應(yīng)抗體的血清即為動物免疫血清。臨床上用來治療破傷風(fēng)和白喉的破傷風(fēng)抗毒素、白喉抗毒素屬此。是用類毒素免疫馬制備的。馬的免疫血清對人具有二重性,一方面,它含有特異性抗體(抗毒素),可以中和相應(yīng)的毒素,起到防治作用;另一方面,馬血清對人而言是異種蛋白,具有免疫原性,可引起血清病或過敏性休克。④異嗜性抗原存在于人、動物、植物及微生物等不同物種間的共同抗原,稱為Forssman抗原。目前已發(fā)現(xiàn)多種異嗜性抗原:大腸桿菌O86與人B血型物質(zhì);肺炎球菌14型與人A血型物質(zhì);大腸桿菌O14型脂多糖與人結(jié)腸粘膜;溶血性鏈球菌抗原與腎小球基底膜及心臟組織;立克次體與變形桿菌。